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YAC


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Ein YAC ( Yeast Artificial Chromosome ) ist ein künstliches Chromosom welches der Hefe nachempfunden ist. Es dient als Vektor und erlaubt im Gegensatz zu den eine Klonierung von größeren Genomabschnitten . Das erste YAC entstand als Kombination ARS und eines Centromers der Hefe mit den Telomeren von Tetrahymena wodurch ein lineares Molekül entstand welches in einer Hefe wie ein normales Chromosom Die Entwickler dieses YAC waren Murray und 1983 . Mit Hilfe dieser Moleküle war es Genomabschnitte zu übertragen die wesentlich größer waren die die mit Hilfe der Cosmide übertargen konnten.

Trotz dieses Vorteils haben die YACs entscheidenden Nachteil. Aufgrund ihrer Länge ist es schwierig sie in flüssigem Medium zu handhaben intakt zu halten. Aus diesem Grund versuchte früher die Abschnitte nicht länger als 50 100 kbp zu konstruieren. Durch ein Verfahren Anand et al. ( 1990 ) (PFGE-Fraktionierung) wurden kurze DNA-Fragmente aus dem entfernt und die durchschnittliche Länge konnte auf kbp verlängert werden. Larin et al. ( 1991 ) gelang es weiterhin durch den Einsatz Polyaminen eine Sabilisierung der Moleküle zu erreichen zum Einsatz beim Mensch- und beim Mausgenom von bis zu 700 kbp möglich wurden. et al. ( 1992 ) entwickeltn sogar eine Genbibliothek mit durchschnittlichen von 810 kbp wobei einige Moleküle Längen bis zu 1800 kbp erreichten.

Als Alternativen zu den YACs wurden sowohl BACs und PACs schließlich sogar MACs (big MACs) und HAECs entwickelt.

Literatur

  • Murray AW Szostak JW: Construction of artificial chromosomes in yeast Nature 305 2049-2054
  • Larin Z Monaco AP Lehrach H Yeast artificial chromosome libraries containing large inserts mouse and human DNA Proceedings of the National Academy of USA 88 4123-4127
  • Bellanné-Chantelot C et al. (1992): Mapping the whole human genome by fingerprinting artificial chromosomes Cell 70 1059-1068




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