Tris Puffer

mospie · Junior Member Anmeldungsdatum: 07.10.2006 Beiträge: 18 Wohnort: Basel

Hallo zusammen,

habe wiedermal eine Frage.
Alle sprechen von TRIS Puffer für die Lyse von Zellen.
Aber wie funktioniert dieser Puffer? Was geschieht genau?
Die Suche im Goggel brachte keine Erfolg.

Danke

mospie

crick · Senior Member Anmeldungsdatum: 18.05.2006 Beiträge: 800

also tris braucht man nicht um die zellen aufzuschließen, sondern einfach nur als puffer. guck mal bei wiki da ist das fut erklärt
http://de.wikipedia.org/wiki/Tris

MattiB · Full Member Anmeldungsdatum: 03.12.2005 Beiträge: 188

Für die Pufferwirkung sollte man in einem einshclägigen Chemie-buch nachlesen, ich weiß leider nicht genau, wie sehr Du dich da schon informiert hast...
Allgemein funktioniert die Pufferwirkung nach der "Henderson-Hasselbalch" Gleichung.
pH = pKs + log(cBase / cSäure).

"Der" TRIS Puffer besteht aus zwei komponenten. Dem Trimethylaminomethan (Säure), und dem Trimethylaminomethananhydrochlorid (Konjugierte Base).

Eine Mischung dieser beiden ergibt dann in einer Wässrigen lösung einen Puffer, der wie bei Wikipedia bereits gesagt, die Enzyme und Protiene nicht selbst beinflusst (außer durch den pH-Wert).

Ich habe letzte Woche das ganze SO gemacht:
2,68g TRIS
4,37g TRIS-Anhydrochlorid
in 500ml Wasser gelöst.
Das ergab einen pH von 8,19 (8,2 sollte rauskommen).

Das sogt bei Proteinen z.B. dafür, dass sie eine konstante definierte Ladung haben. Denn die Funktionellen Gruppen am Protein reagieren Sauer oder Basisch, durch konstanten pH "wackelt" da nix... Für Analysen gut!!